Prosedur Pewarnaan Gram dalam Penyelidikan dan Makmal

Pewarnaan gram ialah prosedur mikrobiologi yang mengkategorikan bakteria berdasarkan struktur fizikal dan kimia permukaan luarnya. Ini dilakukan hanya dengan slaid, mikroskop dan noda. Prosedur ini biasanya digunakan untuk pengesanan dan pengenalpastian bakteria dalam makmal penyelidikan dan klinikal.“”

Gram-Positif dan Gram-Negatif

Bakteria secara longgar dikategorikan kepada dua jenis, gram-positif dan gram-negatif.

• Bakteria Gram-positif mempunyai lapisan tebal yang terdiri daripada polimer molekul protein-gula yang dipanggil peptidoglycan. Pewarnaan Gram lapisan peptidoglycan (iaitu dinding sel) dengan bahan kimia yang dipanggil kristal violet menghasilkan pewarna ungu bakteria gram positif. Penambahan aseton atau alkohol mengeringkan bakteria, menyebabkan ia mengekalkan warna ungu.

• Bakteria Gram-negatif mempunyai membran luar tambahan yang sifatnya menentang aseton/dehidrasi alkohol dan mengakibatkan kehilangan kotoran kristal violet. Noda balas, yang terdiri daripada fuchsin, mengotorkan bakteria ini menjadi merah atau merah jambu.

Ujian ini melibatkan melihat bakteria pada slaid di bawah mikroskop. Bakteria boleh dilihat di bawah mikroskop jika diwarnakan. Bakteria ini boleh dikumpul dalam sampel seperti dari air kencing, kahak, dan darah. Sampel ini digunakan untuk mengenal pasti sama ada bakteria berada di bahagian tertentu badan. Jangkitan selalunya disetempat pada satu bahagian badan seperti pundi kencing, paru-paru, atau tulang, pundi hempedu, kulit. Sesetengah jangkitan lebih umum dan merebak ke seluruh darah.

Bakteria yang mengotorkan ungu adalah gram positif; yang berwarna merah jambu adalah gram-negatif. Ini cara mudah untuk mengetahui maklumat penting. Ia memberitahu kita jenis lapisan pelindung luar bakteria yang ada. Ini membantu doktor memutuskan antibiotik mana yang hendak digunakan dan bakteria mana yang harus dipersalahkan untuk jangkitan – kerana sesetengah bakteria dijangka berkelakuan berbeza daripada yang lain.

Sesetengah bakteria adalah gram positif, seperti Staph Aureus (termasuk MRSA) dan bakteria Strep. Bakteria lain adalah gram-negatif seperti Salmonella, Shigella, dan banyak bakteria lain. (genus) bakteria yang menyebabkan gonorea dan bentuk meningitis bakteria yang menakutkan, Meninogococcus, adalah gram-negatif. Sesetengah bakteria tidak dicirikan dengan baik oleh status gram, tetapi ia berguna untuk banyak jenis bakteria.

Jenis jangkitan selalunya boleh disebabkan oleh jangkitan gram-negatif atau gram-positif tetapi mungkin lebih berkemungkinan disebabkan oleh satu jenis atau yang lain. Pneumonia boleh disebabkan oleh sama ada, tetapi ramai yang mengalami jangkitan gram positif yang disebabkan oleh bakteria Strep. Jangkitan Saluran Kencing selalunya disebabkan oleh jangkitan gram-negatif. Terdapat banyak jenis jangkitan lain yang kebanyakannya boleh menjadi gram-positif atau gram-negatif.

Mengapa Ia Penting

Mengetahui sama ada jenis bakteria yang tidak diketahui adalah gram-negatif atau positif boleh membantu mengenal pasti bakteria tersebut. Doktor selalunya perlu meneka jangkitan mana yang ada pada pesakit. Mereka selalunya perlu merawat secara empirik, seperti yang kita katakan, tanpa mengetahui dengan tepat apa yang menyebabkan jangkitan dan antibiotik yang terbaik. Mengetahui status pewarnaan gram membantu.

Bakteria yang berbeza bertindak balas terhadap antibiotik yang berbeza. Bakteria Gram-positif dan gram-negatif, khususnya, bertindak balas secara berbeza terhadap antibiotik yang berbeza. Mengetahui sama ada bakteria adalah gram neg atau pos boleh membantu menentukan antibiotik yang berkemungkinan besar akan berkesan.

Pewarnaan gram boleh dilakukan di makmal tanpa banyak sumber. Ia hanya memerlukan mikroskop, slaid, noda dan seseorang yang tahu cara melakukan pewarnaan gram.